向日葵为什么总是向着太阳？？在植物体内有一种称为生长素的物质，，，，， ，犹如人体内生长激素一样，，，，， ，它认真给细胞转达信息，，，，， ，指挥植物的生长发育。。。。。受光照影响，，，，， ，生长素会从向日葵茎端向光侧运输到背光侧，，，，， ，爆发浓度差别。。。。。由此，，，，， ，背光侧生长会更快一些，，，，， ，而向光侧慢一些，，，，， ，向日葵的花盘自然就朝向太阳。。。。。
生长素的运输需要细胞膜上的“搬运工”——转运卵白的协助，，，，， ，其中很是主要的一员是认真将生长素从细胞内搬运到细胞外的PIN家族卵白。。。。。这些“搬运工”长什么样？？又是怎样事情？？
8月2日，，，，， ，《自然》杂志上以“快速通道”形式揭晓了中国科学手艺大学生命科学与医学部孙林峰教授团队在植物生长机理上的重大希望，，，，， ，展现了生长素“搬运工”成员PIN1卵白，，，，， ，以及它划分与抑制剂NPA（又名抑草生）、生长素IAA连系的三个高区分率结构，，，，， ，并通过功效剖析阐释了PIN1“搬运”生长素的机制，，，，， ，为明确植物生长素运输调控以及针对PIN家族卵白的农业用除草剂和生长调理剂的设计开发提供了主要基础。。。。。
拟南芥PIN1卵白三种状态下的结构和转运机制示意图 课题组供图
中国科大生命科学与医学部孙林峰教授团队部分成员合影 代蕊 摄
亟待解决的科学问题
作为第一个被发明的植物激素，，，，， ，生长素险些加入了植物生长发育调控的每个历程，，，，， ，如胚胎发育、向光性和向重力性生长等。。。。。生长素一个显著特点是其细胞间转达具有偏向性，，，，， ，被称为极性运输，，，，， ，而PIN家族卵白在其中施展了要害作用。。。。。
特定PIN家族成员在细胞质膜上具有差池称漫衍的特点，，，，， ，它们的漫衍位置决议了生长素“搬运”的偏向。。。。。可是由于缺乏细腻的三维结构，，，，， ，PIN家族卵白特异性识别、转运生长素的机制一直未知。。。。。
NPA是之前在实验室普遍应用的一种生长素极性运输抑制剂，，，，， ，也是农业生产中最早作为除草剂应用的化学小分子之一。。。。。它可以直接靶向PIN家族卵白，，，，， ，可是怎样施展作用的机制尚不清晰。。。。。
孙林峰教授在实验室 代蕊 摄
孙林峰体现，，，，， ，剖析PIN家族卵白的三维结构是生长素研究领域亟待解决的科学问题。。。。。该结构的展现，，，，， ，不但有助于明确生长素的“搬运”历程，，，，， ，同时基于这些结构，，，，， ，有利于研究职员针对PIN家族卵白设计小分子抑制剂，，，，， ，找到更高效、对情形更友好、对人类更清静的除草剂和生长调理剂，，，，， ，应用于农业生产。。。。。
此次研究中，，，，， ，孙林峰团队选择了PIN家族中经典的，，，，， ，也是最早判断出的PIN家族成员之一——拟南芥PIN1卵白作为研究工具。。。。。
乐成展现PIN1卵白结构
“第一步，，，，， ，我们需要证实PIN1卵白确实可以运输生长素。。。。。”孙林峰说，，，，， ，团队花了一年多时间，，，，， ，搭建出一套全新的、基于放射性同位素的功效检测系统，，，，， ，验证了PIN1卵白的生长素“搬运”活性，，，，， ，以及受激酶激活、被NPA抑制的历程。。。。。
第二步，，，，， ，表达和纯化PIN1卵白。。。。。“简朴来说，，，，， ，就是需要获取足量的适于结构剖析的卵白样品。。。。。”孙林峰说，，，，， ，这是最难的一步，，，，， ，由于PIN1卵白在植物体内含量很是低，，，，， ，不可知足实验历程中研究量的需求，，，，， ，因此需要借助于其他细胞表达系统，，，，， ，对卵白举行富集。。。。。
孙林峰教授在指导团队 代蕊 摄
事实上，，，，， ，从2017年建设起团队，，，，， ，最先这项课题研究，，，，， ，一直到2021年，，，，， ，前四年的时间里，，，，， ，他们一直在探索差别表达和纯化、冷冻样品制备等条件。。。。。
“其时，，，，， ，我们天天很早就到了实验室，，，，， ，最先一天的事情。。。。。我们希望早点优化获得性子较好的卵白，，，，， ，加速实验进度，，，，， ，以是经常忙的连水都顾不上喝。。。。。”论文第一作者、中国科大生命科学与医学部博士研究生杨智森说，，，，， ，最终使用哺乳动物表达系统乐成获得了优质样品。。。。。
第三步，，，，， ，使用冷冻电镜单颗粒重构手艺剖析卵白结构。。。。。“冷冻电镜相当于卵白分子的‘摄影师’，，，，， ，可以从差别角度给卵白‘照相’，，，，， ，然后使用这些二维照片重构出三维结构”，，，，， ，孙林峰作了一个类比。。。。。
“冷冻电镜数据网络借助了中国科大冷冻电镜中心和中科院生物物理所生物成像中心提供的优异平台，，，，， ，其中中国科大冷冻电镜中心的300kV高端电镜是2019年最先装置，，，，， ，2020年正式投入运行，，，，， ，为我们结构研究提供了‘利器’”，，，，， ，孙林峰说道。。。。。
可是PIN1卵白“不稳固”，，，，， ，并且分子量较小。。。。。怎样使它们“变大”并坚持一种相对静止的状态？？团队与中国科学院分子细胞科学卓越立异中心李规范团队相助，，，，， ，筛选获得了靶向PIN1卵白的纳米抗体，，，，， ，并首次展现了经典PIN家族卵白成员的三维结构。。。。。
一轮审稿人“恭喜”团队
在这项研究中，，，，， ，团队又进一步剖析出了PIN1与生长素IAA、抑制剂NPA连系的复合体结构，，，，， ，展现了PIN1卵白怎样“装载”生长素，，，，， ，以及NPA“鸠占鹊巢”阻制生长素“搬运”的全貌。。。。。
在以上研究的基础上，，，，， ，团队使用搭建的功效检测系统，，，，， ，验证了却构上发明的一些主要氨基酸位点施展的作用，，，，， ，并提出了PIN家族卵白运输生长素的模子。。。。。
孙林峰教授和高永翔工程师在300kV电镜上样间转移样品 代蕊 摄
从2017年团队建设并最先这项课题研究到2022年在《自然》杂志上揭晓论文，，，，， ，整五年的时间已往了。。。。。“这时代，，，，， ，我们经由了无数次失败的实验，，，，， ，幸亏学生和我们都没有放弃。。。。。”孙林峰说。。。。。
相比于研究历程，，，，， ，论文投稿还算较量顺遂。。。。。“今年1月份我们向《自然》杂志投稿，，，，， ，2月份就收到第一轮评审意见。。。。。”孙林峰说，，，，， ，这个速率在投稿中算较量快，，，，， ，并且评审人都给予了正面的评价。。。。。
第一位审稿人评价：“我们应该恭喜作者们获得这一系列PIN1卵白的主要结构。。。。。在植物心理学领域，，，，， ，生长素运输的主要性不言而喻，，，，， ，作者们获得的这一系列结构关于我们明确生长素IAA怎样被PIN识别和转运做出了主要孝顺”。。。。。
第二位审稿人评价：“这一研究是开创性的发明，，，，， ，是从事生长素运输研究的同仁们翘首以盼的效果”。。。。。
遵照审稿人意见，，，，， ，6月份团队又投回了修改版本；； ；；再经由一轮“精雕细琢”后，，，，， ，7月25日被《自然》正式吸收。。。。。
孙林峰体现，，，，， ，下一步，，，，， ，团队将继续研究PIN1卵白的动态转运历程，，，，， ，捕获差别状态下的三维结构，，，，， ，并进一步研究PIN1卵白受磷酸化激活及调控的机理，，，，， ，更深入的明确PIN家族卵白运输生长素的机制。。。。。同时，，，，， ，基于三维结构设计、筛选化学小分子，，，，， ，力争发明更清静有用的除草剂或植物生长调理剂，，，，， ，更好地效劳农业生产。。。。。
相关论文信息： https://www.nature.com/articles/s41586-022-05143-9